2026.08.06
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【實驗室常用緩衝液｜1 M Tris Buffer，pH 8.0 配製】
【實驗室常用緩衝液】1 M Tris Buffer，pH 8.0 配製指南
Tris Buffer 是分子生物學與生物化學實驗中常見的緩衝系統，適合約 pH 7.5–9.0 的操作環境，常作為 DNA／RNA 萃取、PCR、蛋白質分析，以及 TE、TAE、TBE 等緩衝液的基礎原料。
一、配製規格
■ 基本規格與主要試劑
- 品名：Tris Buffer 濃度：1 M｜pH：8.0｜最終體積：1 L
-
Tris Base (使用量：121.14 g) Tris(hydroxymethyl)aminomethane｜分子式：C₄H₁₁NO₃｜分子量：121.14 g/molCAS No.：77-86-1
■ 另需準備器材與試劑：
- • 純水或去離子水：約 800 mL
- • 鹽酸（HCl）：用於調整 pH
- • 1 L 定量瓶、磁力攪拌器與攪拌子
- • 校正完成的 pH 計
二、標準配製步驟
- 量取約 800 mL 純水或去離子水，置於適當容量的燒杯中。
- 秤取 121.14 g Tris Base，在攪拌狀態下緩慢加入水中，持續攪拌至完全溶解。
- 使用標準緩衝液校正 pH 計，再測量 Tris 溶液的 pH。
- 在持續攪拌下，緩慢加入鹽酸，將溶液調整至 pH 8.0。接近目標值時，應改為少量或滴加，避免 pH 調整過度。
- 將溶液轉移至 1 L 定量瓶，以純水定容至 1 L，充分混合。
- 定容後再次確認 pH；如有偏差，應依實驗室程序進行微量調整並重新確認體積。
- 依用途選擇高壓蒸氣滅菌，或使用 0.22 μm 濾膜進行除菌過濾。核酸相關實驗若對污染較敏感，可優先採用無菌過濾。
- 裝入乾淨且密封良好的容器，標示名稱、濃度、pH、配製日期、保存條件及配製人員。
三、常見實驗用途
- ✓ DNA 與 RNA 萃取
- ✓ PCR 及分子生物學操作
- ✓ 蛋白質與酵素研究
- ✓ 細胞裂解液配製
- ✓ TE、TAE 及 TBE Buffer 配製
- ✓ 電泳與樣品前處理
四、操作注意事項
- ! 溫度依賴性：Tris 的 pH 具有明顯溫度依賴性，應在實際使用溫度或規範指定溫度下調整與記錄 pH；溫度升高時，Tris 緩衝液的 pH 通常會下降。
- ! 安全防護：鹽酸具有腐蝕性，操作時應穿戴實驗衣、防護手套與護目鏡，並在良好通風環境下緩慢加入。
- ! 配方差異：1 M Tris Buffer 不等同於 TE Buffer。TE Buffer 通常還含有 EDTA，兩者不可直接視為相同配方。
- ! 溶解放熱：配製高濃度 Tris 時可能出現溶液升溫現象，應待溫度穩定後再進行最終 pH 確認與定容。
- ! 保存品質：保存期間若出現混濁、沉澱、異常變色或疑似微生物污染，應停止使用並重新配製。
景明化工提醒您：
緩衝液配製不只是「秤重、調 pH、定容」，溫度、試劑純度、水質、pH 電極狀態與保存條件，都可能影響實驗結果的再現性。
正確配製，讓每一次實驗都從穩定的條件開始。
